책소개
현대의학의 발달로 인하여 질병의 치료와 진단이 좀 더 복잡한 양상을 보이고 있다. 특히 질병의
양상이 물리적인 손상 뿐 아니라 유전자 등의 결함으로 인한 병의 원인이 다양해지고 있어 이에 대
한 적극적인 연구 및 진단법이 기존의 검사방법을 포함하여 새로운 검사법이 개발되어 왔다.
2002년 인간유전체프로젝트가 완성됨에 따라 최신의 진단의학은 그 발전 속도가 그 어느 분야보
다도 매우 빠르게 진행되고 있다.
현재 임상병리학검사나 진단의학검사 분야에서도 이러한 추세에 흐름을 같이하여야 한다는 것
은 매우 중요한 것이다. 그러나 기존의 검사법과는 방법상에 차이점이 있어 쉽게 접근하기가 어려
운 점이 사실이다.
이에 이 책에서는 분자생물학의 기초적인 핵산이론을 바탕으로 하여 다양한 핵산추출법과 중합
효소 연쇄반응을 이용한 유전자검출, 유전자 발현분석, 유전자다형성 검출 및 특정의 단백질검출에
대한 실험법, 핵산염기서열법등을 방법론을 중심으로 기술하였다.
이 책은 임상병리학을 전공하는 학생들과 실무에서 분자생물학검사 및 분자유전파트의 실무병리
사들에게도 실제적인 도움이 되리라 믿는다. 또한 최신의 방대한 분자생물학정보를 손쉽게 검색하
기 위한 컴퓨터프로그램을 활용한 생명정보학부분까지도 할애를 하였다. 그리고 무엇보다도 분자
생물학실험에 필수적인 시약조제법 및 사용시약의 위험에 대한 주의사항을 부록으로 할애하여 학
생들로 하여금 접근하기 용이하고, 시약 사용시 매우 주의깊게 실험할 것을 주문하도록 구성하였다.
아직은 미흡한 면이 많이 있을 것으로 보이나 기술된 용어 중에 국문으로 표현하기에 부족한 부분
은 영문으로 표기한 부분 등이나 오류나 표기 미숙 등은 앞으로 계속 수정 보완할 것을 약속드린다.
이 책이 임상분자생물학, 유전진단학을 공부하는데 조금이나마 도움이 되길 바랍니다.
끝으로 이 책의 출간에 도움을 주신 여러 선생님들께 감사의 인사를 드리며, 특히 고려의학 사장
님과 고려의학 편집실 직원 여러분께 감사를 드리는 바이다.
2014년 3월
편저자


목차
01. 임상분자생물학의 개요 / 1
1. 염색체구조 4
2. 뉴클레오티드와 RNA, DNA 구조 6
3. 핵산유전체 이외의 유전체물질 21
4. 혈장 RNA 22
5. 인간 지놈 프로젝트 Human genome project 23
02. DNA의 추출법 / 31
1. DNA 추출의 원리 31
2. 플라스미드 DNA의 분리와 정제의 원리 32
03. 중합효소 연쇄반응 / 59
1. 중합효소 연쇄반응법(PCR)의 원리 60
2. PCR의 실제 61
3. PCR이 잘 안 될 때의 점검사항 및 문제해결 방법 67
4. PCR의 응용 70
5. DNA 젤 전기영동(Electrophoresis) 70
04. 제한효소 / 89
1. Methyl화의 영향 90
2. Star 활성 91
3. 부분 분해 91
4. DNA 결합단백질 91
5. 기타 91
05. 중합효소 연쇄반응-단일쇄 형태구조 다형성(PCR-SSCP) 분석 / 95
1. 서론 95
2. SSCP의 조건 96
3. SSCP 분석을 위한 PCR 시 주의사항 98
4. 일반적인 전기영동 젤(Manual) 98
5. Phast pre-made gel 99
6. 검출법(Detection) 99
7. 결과 분석 100
8. SSCP의 응용 100
06. 역전사-중합효소 연쇄반응 / 109
1. RT-PCR의 원리 109
2. RT-PCR의 방법 110
3. 중합효소 연쇄반응 PCR 114
4. 젤전기영동 Agarose gel electrophoresis 114
07. 웨스턴블럿팅 / 121
1. 원리 121
2. 단백질 검체의 제조 122
3. SDS-PAGE (Sodium dodecyl sulfate-polyacylamide gel electrophoresis) 124
4. 전기에 의한 막으로의 단백질 이동(Electrophoretic transfer to matrix) 125
5. 비특이결합방지(Blocking non-specific binding site) 126
6. 특정 단백질과 특정 항원 간의 항원 - 항체 반응유도(Antibody binding) 126
7. 이차항체 효소 발색반응에 의한 항원항체 복합체 검출 127
08. 핵산염기서열분석 / 141
1. 서론 141
2. 수동 염기서열분석법 145
3. 자동 염기서열분석법 148
4. 염기서열분석 준비 : Kit, 시발체, 시료 149
09. 실시간 정량 중합효소 연쇄반응검사법 / 169
1. 개요 169
2. 정량 PCR의 분석 원리 171
3. Real Time PCR 분석장비 175
4. 정량 PCR의 분석 176
5. 정량방법 177
6. 적용분야 178
10. 임상분자생물학에서의 생명정보학 활용 / 181
1. 서론 181
2. 국립 생명정보센터 NCBI (National Center for Biotechnology Information) 182
3. BLAST-서열 상동성 검색(Sequence Homology Search) 186
4. BCM Search Launcher 189
5. biomax 190
11. 최근에 사용되고 있는 분자생물학 기구 / 193
1. 차세대 염기서열 분석시스템(next generation sequencing) 196
2. 차세대 유전자 발현 분석시스템(Gene Expression profiling) 199
3. 일반적인 분석기기 203
부록 / 217
1. 일반분자생물학 시약 217
2. 시약 사용 시 안전 주의사항(Safety cautions) 229
3. Conversion Tables and Formulas 235
4. 위험물질의 종류 241
한글 찾아보기 / 247
영문 찾아보기 / 249